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美國TSZ試劑盒優(yōu)劣因測試不同而論

更新時間：2015-01-29   點擊次數(shù)：1825次
 　　美國TSZ試劑盒隨著對某些帶有特定突變的惡性腫瘤的了解，科學(xué)家們制備了能特異性識別這些突變的T細胞，并接著將它們灌注回病人體內(nèi)以產(chǎn)生一種抗腫瘤免疫反應(yīng)。盡管在黑色素瘤中已經(jīng)看到了治療的裨益，但人類免疫系統(tǒng)是否能發(fā)起一種針對上皮細胞癌的對突變具有特異性的T細胞反應(yīng)則仍不清楚；上皮細胞癌常常比黑色素瘤所含的突變要少美國TSZ試劑盒一般均配以特殊儀器。為比較不同固相在某一測定中的優(yōu)劣，可應(yīng)用如下的試驗：用其他免疫學(xué)測定方法選出一個典型的陽性標本和陰性標本，將它們進行一系列稀釋后，在不同的固相載體上按預(yù)定的美國TSZ試劑盒操縱步驟進行測定，然后比較結(jié)果。這些T細胞對某罹患被稱為膽管癌的上皮細胞癌患者的腫瘤所表達的一個突變基因具有特異性；該患者的膽管癌已經(jīng)擴散到了肝與肺。
　　1.固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板
　　2.美國TSZ試劑盒包被抗體(或抗原)的選擇：將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。
　　3.酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接美國TSZ試劑盒法進行初步效價的滴定。
　　4.酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。　　注意事項
　　1．美國TSZ試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
　　2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
　　3．美國TSZ試劑盒各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
　　4．請每次測定的同時做標準曲線，做復(fù)孔。如美國TSZ試劑盒標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
　　5．美國TSZ試劑盒封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
　　6．底物請避光保存。
　　7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
　　8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
　　9．本美國TSZ試劑盒不同批號組分不得混用。
　　10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。
     美國TSZ試劑盒將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，美國TSZ試劑盒每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實際應(yīng)用中，通過不同的設(shè)計，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法(圖a)、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。